QX200數(shù)字PCR儀采用QX200微滴發(fā)生器將含有核酸分子的反應(yīng)體系形成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子,且每個微滴都作為一個獨立的PCR反應(yīng)器。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,采用微滴閱讀儀逐個對每個微滴進(jìn)行檢測,根據(jù)熒光信號的有無判斷該微滴是否含有待檢靶分子。在泊松分布原理的基礎(chǔ)上,根據(jù)陽性微滴的比例,分析軟件可計算給出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù)。
注意:
1.儀器安置:QX200數(shù)字PCR儀應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少并遠(yuǎn)離水源和熱源的地方,且無腐蝕性氣體或強(qiáng)磁場干擾。環(huán)境溫度建議在18——35℃之間。儀器之間應(yīng)保持50cm 以上距離,以降低儀器之間的影響。
2.儀器清潔:平時用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體;打開PCR儀,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發(fā)去除。一般5~10min即可。如果儀器出現(xiàn)熒光污染,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。
3.更換保險絲:若PCR儀出現(xiàn)故障,可先將PCR儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀察是否恢復(fù)正常。